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            Elisa試劑盒標(biāo)本的保存要求及處理方法
            點(diǎn)擊次數(shù):1245 更新時(shí)間:2020-04-26
                  一、Elisa試劑盒的保存要求:
              對收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,*-70℃凍存?zhèn)溆谩?/div>
              二、Elisa試劑盒的常見液體標(biāo)本的處理方法:
              液體類標(biāo)本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
              ①血清:室溫血液自然凝固0-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
              ②尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
              ③組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
              三、標(biāo)本處理注意事項(xiàng):
              ().均質(zhì):
              ①組織樣本:肉、肝食品類切細(xì),用絞肉機(jī)反復(fù)絞碎,混合均勻。
              ②水產(chǎn)樣本:去除樣品的非食用部分,食用部分切細(xì),用均質(zhì)器均漿;原料表面較臟時(shí),需適當(dāng)用蒸餾水清洗。
              ③蛋類:鮮蛋去殼,蛋黃和蛋白充分混勻。
              ④水果、蔬菜類:先用水洗去泥沙,然后除去表面的水分,取食用部分。
              (2).振蕩提取:
              將提取溶劑加入到裝有樣品的具塞容器中,振蕩,使提取溶劑與容器內(nèi)的樣品充分接觸以深入到樣本組織內(nèi)部,提取待測組分。
              ①振蕩方式:振蕩器上進(jìn)行上下、往返式振蕩、手搖式上下振蕩。
              ②在組織樣本中加入有機(jī)溶劑之間提取時(shí),應(yīng)邊加邊振蕩,防止組織凝結(jié)成團(tuán),不利于提取。
              (3).乳化現(xiàn)象:
              在用有機(jī)溶劑提取過程中,如果出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,解決的方法有:
              ①用細(xì)頭輕輕的攪拌,破壞乳化后,再重復(fù)離心。
              ②再加入適量的提取劑,重新振蕩。注意離心后要保證樣本的稀釋倍數(shù)不變。
              (4).濃縮:
              由于凈化過程中引入的溶劑,可能會(huì)降低待測組分的濃度或者不適宜直接分析,需要去除全部有機(jī)溶劑。即試劑盒前處理步驟中把樣本在60℃氮?dú)庀麓蹈桑儆脧?fù)溶液溶解干燥殘留物。
              濃縮方式:氮?dú)獯蹈沙s、壓縮空氣吹干除雜。
              請注意:
              ①在吹干樣本之前,用甲醇清洗針頭,防止雜質(zhì)干擾。
              ②在吹樣本時(shí),針頭應(yīng)在液面上空,避免與樣本接觸,防止產(chǎn)生交叉污染。
              ③樣本吹干后應(yīng)立即取下,避免吹的時(shí)間過長,影響*終檢測結(jié)果。
              ④不同的藥物,吹干后樣本的保質(zhì)期不同,提倡待樣本回到室溫后立即復(fù)溶。
              (5).凈化:
              經(jīng)過提取的待測組分中通常含有一些會(huì)干擾試劑盒中抗原抗體反應(yīng)的雜質(zhì)或者是含有與待測物結(jié)構(gòu)相似的雜質(zhì)。將待測組分與雜質(zhì)分離的過程,我們稱為試劑盒中樣本的凈化。在我們現(xiàn)有的試劑盒前處理方法中涉及到的常見的凈化是:液液分配法。

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