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            滅鮭氣單胞菌PCR定量試劑盒陽性對照反應(yīng)體系
            點(diǎn)擊次數(shù):938 更新時間:2020-05-21

            滅鮭氣單胞菌PCR定量試劑盒陽性對照反應(yīng)體系:

            a)模板DNA:選用樣本純化的DNA。

            b)引物的選擇:建議選擇該樣本較易擴(kuò)增的基因的引物,如 β-actin 基因或 GAPDH 等。

            4.2 陰性對照

            PCR反應(yīng)體系被污染會導(dǎo)致PCR結(jié)果出現(xiàn)假陽性,需要設(shè)置陰性對照來排除。將使用的移液器槍頭浸泡在2× Blood Master Mix中,添加引物,ddH2O進(jìn)行PCR擴(kuò)增;另取ddH2O作為模板,用目的基因引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,以排除PCR體系是否被污染和實(shí)驗(yàn)是否有其他污染源。

            注意事項(xiàng)


            . 盡量使用新鮮抗凝血。若凍存血,應(yīng)避免反復(fù)凍融。

            2. 解凍后2× Blood Master Mix可能出現(xiàn)渾濁,冰上放置-2 min,待溶液澄清后,上下顛倒混勻,不影響試劑性能。

            3. 電泳檢測時,切勿使用含有 SDS 的Loading Buffer,否則在電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
            4. 建議擴(kuò)增片段長度 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率*。

            5. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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