西部馬腦脊髓炎病毒PCR進口試劑盒擴增產物在電泳分析
點擊次數:851 更新時間:2020-06-18
西部馬腦脊髓炎病毒PCR進口試劑盒擴增產物在電泳分析時沒有條帶或條帶很淺
)zuichang見的原因在于您的反應體系是PCR的反應體系而不是RT-PCR的反應體系
3) 與反應起始時RNA的總量及純度有關
4) 建議在試驗中加入對照RNA
5) 一鏈的反應產物在進行PCR擴增時,在總的反應體系中的含量不要超過/0
6) 建議用Oligo(dT)或隨機引物代替基因特異性引物(GSP)用于一鏈合成。由于RNA模板存在二級結構,如環狀結果,有可能導致GSP無法與模板退火;或SSⅡ反轉錄酶無法從此引物進行有效延伸。
7) 目的mRNA中含有強的轉錄中止位點,可以試用以下方法解決:
a. 將一鏈的反應溫度提高至50℃。
b. 使用隨機六聚體代替Oligo(dT)進行一鏈反應。