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豬轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

豬轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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豬轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細(xì)資料

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產(chǎn)品名稱:豬轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱: TFR ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測(cè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測(cè)種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床 。

豬轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測(cè)抗體、
(四)競(jìng)爭(zhēng)法。
豬轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
豬轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測(cè)未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍,即為陽性。

HCST    重組人 HCST / DAP0 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    BspTI (AflII)
EEFE    重組人 EEFE / AIMP3 / p8 蛋白 (His 標(biāo)簽)    Pfl23II (BsiWI)
LRP    重組人 LRP 蛋白 (His 標(biāo)簽)    BseGI (BtsCI)
BCL2L    重組人 BCL2L / Bim 蛋白 (His 標(biāo)簽)    BseGI (BtsCI)
FAM7B    重組人 FAM7B / KIAA946 蛋白 (His 標(biāo)簽)    BseNI (BsrI)
AGA    重組人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 蛋白 (His 標(biāo)簽)    BseNI (BsrI)
STATH    重組人 Statherin / STATH 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    Bsh285I (BsiEI)
TMUB2    重組人 TMUB2 蛋白 (His 標(biāo)簽)    Acc65I (Asp78I)
SUSD4    重組人 SUSD4 / Sushi domain-containing protein 4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    Acc65I (Asp78I)
SCG2    重組人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 標(biāo)簽)    VspI (AseI)
BTN3A3    重組人 BTN3A3 蛋白 (His 標(biāo)簽)    VspI (AseI)
LRG    重組人 LRG 蛋白 (His 標(biāo)簽)    Bsh236I (BstUI)
LRG    重組人 LRG 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    Bsh236I (BstUI)
CGREF    重組人 CGREF 蛋白 (His 標(biāo)簽)    Bsp407I (BsrGI)
CALCB    重組人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    Bsp407I (BsrGI)
AFM    重組人 AFM / Afamin 蛋白 (His 標(biāo)簽)    Psp406I (AclI)
SIGLEC6    重組人 SIGLEC6 / CD327 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    Psp406I (AclI)RNA 溶解液    0mL    
彩色 Acryl 助沉劑    g    
柱式 DNA 膠回收試劑盒    50 次    
即用型封堵液 (NC )     50mL    
40640-20    Caspase 4 檢測(cè)試劑盒     20 次
70705-0    DNA 洗脫液    0mL
Sodium orthovanadate( 磷酸酯酶抑制劑 )    2g    
Dihydrorhodamine 23     0mg    
柱式分枝桿菌 DNAout    50 次    
HB25 菌種    mL    
豬轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格30408-0    克必隆 eTS 抑制性差減雜交 PCR 試劑盒    0 次
50903-0    微量核酸沉淀劑    0mL
雙染細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Annexin V-EGFP·PI)    50 次    
大腸桿菌 DNA 連接酶    000U    
RNase-free Tris HCl,M,pH 9.0    00mL    
植物蛋白酶抑制劑    mL    
20408-000    綠豆核酸酶    000U
90206-20    雜交袋    20 個(gè)
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )    50L    

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