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豬轉鐵蛋白受體(TFR)酶聯免疫elisa試劑盒規格

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豬轉鐵蛋白受體(TFR)酶聯免疫elisa試劑盒規格 詳細資料

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產品名稱:豬轉鐵蛋白受體(TFR)酶聯免疫elisa試劑盒規格
英文名稱: TFR ELISA Kit
規格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

豬轉鐵蛋白受體(TFR)酶聯免疫elisa試劑盒規格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
豬轉鐵蛋白受體(TFR)酶聯免疫elisa試劑盒規格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
豬轉鐵蛋白受體(TFR)酶聯免疫elisa試劑盒規格技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

HCST    重組人 HCST / DAP0 蛋白 (Fc 標簽)    BspTI (AflII)
EEFE    重組人 EEFE / AIMP3 / p8 蛋白 (His 標簽)    Pfl23II (BsiWI)
LRP    重組人 LRP 蛋白 (His 標簽)    BseGI (BtsCI)
BCL2L    重組人 BCL2L / Bim 蛋白 (His 標簽)    BseGI (BtsCI)
FAM7B    重組人 FAM7B / KIAA946 蛋白 (His 標簽)    BseNI (BsrI)
AGA    重組人 AGA / ASRG / Aspartylglucosaminidase 蛋白 (His 標簽)    BseNI (BsrI)
STATH    重組人 Statherin / STATH 蛋白 (Fc 標簽)    Bsh285I (BsiEI)
TMUB2    重組人 TMUB2 蛋白 (His 標簽)    Acc65I (Asp78I)
SUSD4    重組人 SUSD4 / Sushi domain-containing protein 4 蛋白 (Fc 標簽)    Acc65I (Asp78I)
SCG2    重組人 SCG2 / Secretogranin II 蛋白 (His 標簽)    VspI (AseI)
BTN3A3    重組人 BTN3A3 蛋白 (His 標簽)    VspI (AseI)
LRG    重組人 LRG 蛋白 (His 標簽)    Bsh236I (BstUI)
LRG    重組人 LRG 蛋白 (Fc 標簽)    Bsh236I (BstUI)
CGREF    重組人 CGREF 蛋白 (His 標簽)    Bsp407I (BsrGI)
CALCB    重組人 CALCB / CGPR / Calcitonin 2 蛋白 (Fc 標簽)    Bsp407I (BsrGI)
AFM    重組人 AFM / Afamin 蛋白 (His 標簽)    Psp406I (AclI)
SIGLEC6    重組人 SIGLEC6 / CD327 蛋白 (Fc 標簽)    Psp406I (AclI)RNA 溶解液    0mL    
彩色 Acryl 助沉劑    g    
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即用型封堵液 (NC )     50mL    
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Sodium orthovanadate( 磷酸酯酶抑制劑 )    2g    
Dihydrorhodamine 23     0mg    
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大腸桿菌 DNA 連接酶    000U    
RNase-free Tris HCl,M,pH 9.0    00mL    
植物蛋白酶抑制劑    mL    
20408-000    綠豆核酸酶    000U
90206-20    雜交袋    20 個
Tricine-SDS-PAGE 陰極電泳液 ( 干粉 )    50L    

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