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小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯免疫elisa試劑盒規格

小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯免疫elisa試劑盒規格

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小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯免疫elisa試劑盒規格 詳細資料

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產品名稱:小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯免疫elisa試劑盒規格
英文名稱: Hsp-70 ELISA Kit

規格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯免疫elisa試劑盒規格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯免疫elisa試劑盒規格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)酶聯免疫elisa試劑盒規格技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

HL    重組人 CHL- 蛋白 (His 標簽)    CHL
B2M    重組人 B2M / Beta-2-microglobulin 蛋白 (His 標簽)    B2M
CSH    重組人 Placental Lactogen / CSH 蛋白 (His 標簽)    CSH
CD97    重組人 CD97 蛋白 (Fc 標簽)    CD97
LILRB3    重組人 LILRB3 / LIR3 / ILT5 / CD85a 蛋白 (His 標簽)    LILRB3
LUM    重組人 Lumican / LUM 蛋白 (His 標簽)    LUM
LCN    重組人 LCN / VEGP / Lipocalin- 蛋白 (His 標簽)    LCN
MANF    重組人 MANF / ARMET 蛋白 (His 標簽)    MANF
CDH5    重組人 VE-Cadherin / CD44 / CDH5 蛋白 (His & Fc 標簽)    CDH5
CRTAM    重組人 CRTAM 蛋白 (His 標簽)    CRTAM
LRP    重組人 LRP / A2MR / CD9 蛋白 (aa 786-65)    LRP
ICOSLG    重組人 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His 標簽)    ICOSLG
FCRL    重組人 FCRL / FCRH 蛋白 (His 標簽)    FCRL
ANGPT2    重組人 ANG2 / Angiopoietin-2 蛋白 (His 標簽)    ANGPT2
METTL    重組人 METTL 蛋白 (His 標簽)    METTL326-20    一站式平末端克隆試劑盒    20 次
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動物細胞核蛋白微量制備試劑盒    00 次    
    g    
    250mg    
CAS779-8-6    氯化鎂六水    00g
30533-0    木瓜蛋白酶抑制劑溶液,0.5 mg/mL    0mL
柱式尿液 DNAout    50 次    

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