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小鼠抗內皮細胞抗體(AECA)酶聯免疫elisa試劑盒規格

小鼠抗內皮細胞抗體(AECA)酶聯免疫elisa試劑盒規格

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小鼠抗內皮細胞抗體(AECA)酶聯免疫elisa試劑盒規格 詳細資料

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產品名稱:小鼠抗內皮細胞抗體(AECA)酶聯免疫elisa試劑盒規格
英文名稱: AECA ELISA Kit
規格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

小鼠抗內皮細胞抗體(AECA)酶聯免疫elisa試劑盒規格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠抗內皮細胞抗體(AECA)酶聯免疫elisa試劑盒規格標本要求
.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后5分鐘以內進行。
小鼠抗內皮細胞抗體(AECA)酶聯免疫elisa試劑盒規格技術流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。CAY0648 ( mg)    5-chloro-2,2’-dioxo-,-dimethylethyl ester-spiro[3H-indole-3,3’-pyrrolidine]-(2H)-acetic acid; CAY0648     2,5-二氟三氟    分子式:    82.09    分子量:     C7H3F5    英文名稱:    2,5- two f three f    :    393-38-4
2-chloro-3-Deazaadenosine (5 mg)    6-chloro--β-D-ribofuranosyl-H-imidazo[4,5-c]pyridin-4-amine; 2-CADO|6-Amino-2-chloropurine riboside|NSC 58902-chloro-3-Deazaadenosine     -丁-3-甲氯吡鎓    分子式:    85.7    分子量:     C0H6ClN    英文名稱:    - butyl -3- methyl pyridinium chloride    :    25652-55-3
JWH 073 N-(2-methylpropyl) isomer ( mg)    (-isobutyl-H-indol-3-yl)(naphthalen--yl)methanone; JWH 073 N-(2-methylpropyl) isomer     六    分子式:    534.7    分子量:     C42H30    英文名稱:    Six phenyl benzene    :    992-04-
JWH 20 7-ethylnaphthyl isomer (5 mg)    (7-ethyl--naphthalenyl)(-pentyl-H-indol-3-yl)-methanone; JWH 234; JWH 20 7-ethylnaphthyl isomer     4-(4-嗎啉)吡    分子式:    64.2    分子量:     C9H2N2O    英文名稱:    4- (4- morpholinyl) pyridine    :    2767-9-
3-Methyl-α-pyrrolidinobutiophenone (hydrochloride) (5 mg)    2-(pyrrolidin--yl)--(m-tolyl)butan--one, monohydrochloride; 3-Me-α-PBP|3-MePBP; 3-Methyl-α-pyrrolidinobutiophenone (hydrochloride)     2-(3-溴)萘    分子式:    283    分子量:     C6HBr    英文名稱:    2- (3-) naphthalene    :    667940-23-0
9(Z),(E)-Conjugated Linoleic Acid (0 mg)    9Z,E-octadecadienoic acid; 9Z,E-CLA|Bovinic acid; 9(Z),(E)-Conjugated Linoleic Acid     8-溴異喹啉    分子式:    208.06    分子量:     C9H6BrN    英文名稱:    8- bromide    :    63927-22-0
Palmitoyl Ethanolamide (50 mg)    N-(2-hydroxyethyl)-hexadec*; PEA|Palmidrol; Palmitoyl Ethanolamide     4-硝吡唑    分子式:    3.07    分子量:     C3H3N3O2    英文名稱:    4- nitro    :    2075-46-9
Sumanirole Maleate (0 mg)    5R,6-dihydro-5-(methylamino)-2Z-butenedioate-4H-imidazo[4,5,-ij]quinolin-2(H)-one; PNU 95666; Sumanirole Maleate     三氟磺酸銅與甲的絡合物    分子式:    57.37    分子量:     (CF3SO3Cu)2 · C6H5CH3    英文名稱:    三氟磺酸銅與甲的絡合物    :    48209-28-5
Sunitinib Malate (0 mg)    N-[2-(diethylamino)ethyl]-5-[(Z)-(5-fluoro-,2-dihydro-2-oxo-3H-indol-3-ylidene)methyl]-2,4-dimethyl-H-pyrrole-3-carboxamide,(2S)-hydroxy-Butanedioic acid; Sutent     4-惡唑    分子式:        分子量:        英文名稱:    4- phenyloxazoline    :    20662-89-9pMCSG35B    pTRE-Tight-BI-AcGFP(pTRETightBIAcGFP)
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