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小鼠程序性死亡(PD-)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

小鼠程序性死亡(PD-)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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小鼠程序性死亡(PD-)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細(xì)資料

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產(chǎn)品名稱:小鼠程序性死亡(PD-)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱: PD- ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲(chǔ)條件:2-8℃
有效期:6個(gè)月
特異性:本ELISA檢測(cè)試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
檢測(cè)種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測(cè)試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床 。

小鼠程序性死亡(PD-)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類型的檢測(cè)方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測(cè)抗體、
(四)競(jìng)爭(zhēng)法。
小鼠程序性死亡(PD-)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說(shuō)明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠程序性死亡(PD-)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測(cè)未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時(shí),洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍,即為陽(yáng)性。
二、間接法(檢測(cè)未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.倍,即為陽(yáng)性。

甲乙    分子式:    06.4    分子量:    C3H6O2S    英文名稱:    Methylvinylmethyl    :    3680/2/2
甲乙砜    分子式:    08.6    分子量:    C3H8O2S    英文名稱:    Methylethylketone    :    594-43-4
甲紫    英文名稱:    Methylviolet    :    8004-87-3    分子式:    407.99    分子量:    C25H30ClN3
鉀    分子式:    38.55    分子量:    KClO4    英文名稱:    Potassiumperchlorate    :    7778-74-7
假荊芥屬苷    英文名稱:    Nepetaglycoside    :    569-90-4    分子式:    478    分子量:    C22H22O2
間碘三氟甲    分子式:    272.0    分子量:    C7H4F3I    英文名稱:    Iodinethreefluorinetoluene    :    40-8-0
間碘三氟甲氧    分子式:    288.0    分子量:    C7H4F3IO    英文名稱:    Iodinethreefluorinemethylgroup    :    98206-33-6
間二(三氟甲)    分子式:    24.    分子量:    C8H4F6    英文名稱:    Betweentwo(threef)benzene    :    402-3-3
間二酚    英文名稱:    Resorcinol    :    08-46-3    分子式:    0.    分子量:    C6H6O2;C6H4-,3-(OH)
間二酚藍(lán)    英文名稱:    Resorcinblue    :    7939-2-3    分子式:    429.39    分子量:    C24H5NO7
間二甲    分子式:    06.6    分子量:    C8H0;C6H4(CH3)2    英文名稱:    Metaxylene    :    08-38-3DNA 上樣液 ( 紅 ),6×( 非甘油 )    0mL    
DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (2)(300-5000 bp)    50 次    
McCoy's5A 培養(yǎng)基 ( 含 % 雙抗 )    500mL    
Ac-LEHD-FMK(Caspase9Inhibitor)    20μL    
氯化血紅素    g    
L-Glutathione (reduced form)( 抗氧化劑 )    g    
DNA 洗脫液    50mL    
尿酸酶    00U    
肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子    5mL    
BamHI    2000U    
小鼠程序性死亡(PD-)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格一管式點(diǎn)突變?cè)噭┖?nbsp;   0 次    
8004-50    一站式柱式 miRNAout    50 次
XL0-Gold 感受態(tài)細(xì)胞    0. mL×0    
PCR 抑制物清除劑    mL    
23-0040-20    Ac-IETD-FMK(Caspase8Inhibitor)    20μL
3276-250    Baker 甲醛鈣中性固定液    250 mL
328F-00    動(dòng)物種屬鑒定 PCR Mix 6    00 次
6040-250    RNase-free 75% 乙醇    250mL

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