小鼠肌骼肌衛星細胞培養試劑盒說明書

小鼠肌骼肌衛星細胞培養試劑盒【MouseSkeletalPrimacellTM：Normal Skeletal Satellite Cells】
  小鼠肌骼肌衛星細胞培養試劑盒說明書肌衛星細胞指骨骼肌中除骨骼肌纖維（肌細胞）外的一種扁平、有突起的細胞。附著于肌纖維（肌細胞）表面；當肌纖維（肌細胞）受損后，肌衛星細胞可增殖分化，參與肌纖維（肌細胞）的修復，因此具有干細胞性質。 雖然骨骼肌組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的骨骼肌組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的骨骼肌組織片能使得骨骼肌組織中成骨骼肌衛星細胞的一些功能特性發生改變，從而將成骨骼肌衛星細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養新生兒或成年人的成骨骼肌衛星細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個衛星細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的衛星細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的成骨骼肌原代衛星細胞中成纖維衛星細胞的含量。 小鼠肌骼肌衛星細胞衛星細胞培養試劑盒適合于培養人的成骨骼肌組織衛星細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠肌骼肌衛星細胞組織解離液（3×ml） （2）小鼠肌骼肌衛星細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠肌骼肌衛星細胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）小鼠肌骼肌衛星細胞組織洗液（5x00 ml） （5）小鼠肌骼肌衛星細胞生長因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠肌骼肌衛星細胞基礎培養基（5 x00ml） （7）小鼠肌骼肌衛星細胞組織預備液（ x00 ml） （8）小鼠肌骼肌衛星細胞培養試劑盒使用說明書

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注意事項：
. 接收到小鼠肌骼肌衛星細胞培養試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。

培養步驟：
小鼠肌骼肌衛星細胞培養試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

產氣腸桿菌 Enterobacter aerogenes根瘤菌 Rhizobium sp.

新生兒表皮角化細胞*培養基EA.hy926(人臍靜脈細胞融合細胞)

產朊假絲酵母 Candida utilis植物桿菌 Lactobacillus plantarum

GH3(大鼠垂體瘤細胞)大鼠肺大動脈內皮細胞*培養基

酒假絲酵母 Candida kefyr球擬圓酵母 Torulopsis globosa

豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum宇佐美曲霉 Aspergillus usamii

MLTC-(小鼠睪間質細胞瘤細胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformisNG08-5(小鼠神經細胞瘤與大鼠神經膠質瘤之融合細胞)

柱形孢鏈霉菌 Streptomyces cylindrosporus桿菌屬 Lactobacillus sp.

人大細胞肺細胞苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

小鼠肌骼肌衛星細胞培養試劑盒說明書解毒喹英文名稱：Detoxification分子式：335.83分子量： C8H22ClNO3：99607-70-2

5,5-二硫-,-雙四氮唑分子式：354.4英文名稱：5,5- two -,- double sulfur phenyl tetrazole：7574分子量： C4H0N8S2

2-氯-6-甲-4-吡甲醛分子式：55.58英文名稱：2- -6- methyl -4-：47963-6-6分子量： C7H6ClNO

-芐分子式：75.27英文名稱：- benzyl piperidine：2905-56-8分子量： C2H7N

芐分子式：22.7英文名稱：Benzyl hydrazine：555-96-4分子量： C7H0N2

4-溴噻唑分子式：64.02英文名稱：4- thiazole bromide：34259-99-9分子量： C3H2BrNS

安格洛苷C英文名稱：Angelo C分子式：784.755分子量：C36H48O9：5909-22-3

4-羥-3-硝吡分子式：40.英文名稱：4- hydroxy -3- nitro pyridine：5435-54-分子量： C5H4N2O3

,3,5-三乙分子式：62.27英文名稱：,3,5- three ethyl benzene：02-25-0分子量： C2H8

2-乙酰胺-5-巰-,3,4-噻二唑分子式：75.23英文名稱：2- acetyl -5- -,3,4- two：32873-56-6分子量： C4H5N3OS2