小鼠肺大動脈平滑肌細胞培養試劑盒說明書

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小鼠肺大動脈平滑肌細胞培養試劑盒【Mouse Lung PrimacellTM：NormalArtery Smooth Muscle Cells】
     小鼠肺大動脈平滑肌細胞培養試劑盒說明書小鼠肺大動脈平滑肌細胞分離自正常小鼠肺動脈組織，細胞呈梭形或多角形。該細胞所表達的鈣通道表面表達的ICAM-和VCAM-，參與血管壁炎癥反應。該細胞也是多數重要動脈疾病的靶細胞。 雖然肺大動脈組織機械韌性很強，但利用本公司試劑盒中提供的肺大動脈組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的薄的肺大動脈組織片能使得肺大動脈組織中成肺大動脈細胞的一些功能特性發生改變，從而將成肺大動脈細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養新生兒或成年人的成肺大動脈細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養的成肺大動脈原代細胞中成纖維細胞的含量。 小鼠肺大動脈平滑肌細胞培養試劑盒適合于培養肺大動脈組織細胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM小鼠肺大動脈平滑肌細胞組織解離液（3×ml） （2）小鼠肺大動脈平滑肌細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM小鼠肺大動脈平滑肌細胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）小鼠肺大動脈平滑肌組織洗液（5x00 ml） （5）小鼠肺大動脈平滑肌細胞生長因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）小鼠肺大動脈平滑肌細胞基礎培養基（5 x00ml） （7）小鼠肺大動脈平滑肌組織預備液（ x00 ml） （8）小鼠肺大動脈平滑肌細胞培養試劑盒使用說明書
培養步驟：
小鼠肺大動脈平滑肌細胞培養試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。?

赭綠青霉 Penicillium ochrochloronUM-UC-3, 人膀胱移行細胞

根瘤菌 Rhizobium sp.紅曲霉 Monascus anka

PATU8988(人胰腺細胞)人睪支持細胞*培養基

雙孢蘑菇 Agaricus bisporus鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus

胰凝蛋白酶(含0mL酶解緩沖液)蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

小鼠腸粘膜上皮細胞*培養基SW 780(人膀胱移行細胞)

植物桿菌 Lactobacillus plantarum溝腸桿菌 Enterobacter cloacae

費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii異旋孢腔菌 Cochliobolus heterostrophus

mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞結腸

少根根霉 Rhizopus arrhizus人腦血管平滑肌細胞

小鼠肺大動脈平滑肌細胞培養試劑盒說明書3-氯-4-硝三氟甲分子式：225.55英文名稱：3- -4- nitro three：402--9分子量： C7H3ClF3NO2

6-溴-2-乙酰吡分子式：200.03英文名稱：6- -2- acetyl pyridine：49669-3-8分子量： C7H6BrNO

2-溴-5-氟甲分子式：89.02英文名稱：2- -5- fluoride：452-63-分子量： C7H6BrF

2--5-巰-,3,4-噻二唑分子式：33.2英文名稱：2- amino -5- -,3,4- two：2349-67-9分子量： C2H3N3S2

4,4''-二對三聯分子式：482.英文名稱：4,4''- two iodine to three：9053-4-6分子量： C8H2I2

3-(2,5-二甲氧)-H-吡唑分子式：英文名稱：3- (2,5- two) -H-：822-45-2分子量： CH2N2O2

梔子甙英文名稱：Gardenia分子式：388.37分子量：C7H24O0：2452-63-8

7-羥喹啉分子式：45.6英文名稱：7- hydroxy group：580-20-分子量： C9H7NO

2-巰-6-甲并惡唑分子式：65.2英文名稱：2- mercapto -6- methyl benzoxazole：22876-22-8分子量： C8H7NOS

,3,5-三(三氟甲)分子式：282.英文名稱：,3,5- three (three f) benzene：729-8-7分子量： C9H3F9

注意事項：
. 接收到小鼠肺大動脈平滑肌細胞培養試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收到時的培養瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養瓶。
4.將細胞培養瓶內的培養基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養基培養細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養瓶，37℃，5%CO2培養。