大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)

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大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Rat Bone PrimacellTM：Normal Osteoblastic Cells】
     大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)骨代謝過(guò)程中，成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞相互協(xié)調(diào)，使骨質(zhì)的形成與吸收處于一種動(dòng)態(tài)平衡，維持骨骼的不斷更新。其中，成骨細(xì)胞是骨形成細(xì)胞，對(duì)骨組織的生長(zhǎng)發(fā)育、骨代謝平衡、骨量平衡和骨損傷修復(fù)起關(guān)鍵作用。體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞，作為常用的體外實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，成為研究骨生理、病理及修?fù)的重要手段，也成為研究成骨細(xì)胞生長(zhǎng)代謝及骨組織工程的基礎(chǔ)。 雖然骨組織機(jī)械韌性很強(qiáng)，但利用本公司試劑盒中提供的骨組織分離體系來(lái)分離，EDTA/EGTA處理過(guò)的薄的骨組織片能使得骨組織中成骨細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將成骨細(xì)胞分離開(kāi)來(lái)。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)新生兒或成年大鼠的成骨細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的成骨原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的成骨組織細(xì)胞。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠成骨細(xì)胞組織解離液（3×ml） （2）大鼠成骨細(xì)胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠成骨細(xì)胞成纖維抑制劑（ml（500x）） （4）大鼠成骨組織洗液（5x00 ml） （5）大鼠成骨細(xì)胞生長(zhǎng)因子（ml 500x）及血清（5x0ml） （6）大鼠成骨細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x00ml） （7）大鼠成骨組織預(yù)備液（ x00 ml） （8）大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說(shuō)明書
培養(yǎng)步驟：
大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

小鼠腸巨噬細(xì)胞*培養(yǎng)基00mL

人內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基00mL

茄腐鐮刀菌 Fusarium solani

Hepa -6, 小鼠肝細(xì)胞

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

桔橙小單孢菌 Micromonospora aurantiaca

大鼠神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基00mL

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

黑白輪枝孢

大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)3-(3-溴)吡分子式：234.092英文名稱：3- (3-) pyridine：4422-32-6分子量： CH8BrN

2-羥-3-硝-5-(三氟甲)吡分子式：208.09英文名稱：2- hydroxy -3- nitro -5- (three f) pyridine：33252-64-分子量： C6H3F3N2O3

2-嘧分子式：95.英文名稱：2- amino group：09-2-6分子量： C4H5N3

氨丙咪唑分子式：英文名稱：Ammonium group：分子量：

堿性品綠英文名稱：Basic green分子式：364.9分子量： C23H25ClN2：569-64-2

二甲萘分子式：56.22英文名稱：Two methyl naphthalene：28804-88-8分子量： C2H2

茶海明英文名稱：Dramamine分子式：499.95分子量： C7H2NO.C7H7ClN4O：523-87-5

人參皂甙Rc英文名稱：Ginsenoside Rc分子式：079.2685分子量：C53H90O22：02-4-0

3-(4-溴)-5-甲-H-吡唑分子式：英文名稱：3- (4-) -5- methyl -H-：45353-53-3分子量： C0H9BrN2

三乙氫硼鉀分子式：38.英文名稱：Three ethyl potassium：22560-2-0分子量： C6H6BK

注意事項(xiàng)：
. 接收到大鼠成骨細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒培養(yǎng)，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過(guò)的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。