大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)試劑盒說明書

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大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)試劑盒【Rat BrainPrimaCell: Normal Nerve Microglia】
     大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)試劑盒說明書神經(jīng)是神經(jīng)纖維構(gòu)成的組織,把腦和脊髓的興奮傳給各個器官或把各個器官的興奮傳給腦和脊髓。其中，鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞是神經(jīng)膠質(zhì)形成的主要功能細胞。神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中，當程序性細胞死亡時，或在大腦發(fā)育的過程中，中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時，神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細胞。膠質(zhì)細胞能在II類組織相容性復合體表達CD-4陽性Ｔ細胞時表達抗原，能進行Fc介導的巨噬作用，并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。 利用本公司試劑盒中提供的神經(jīng)組織分離體系來分離，EDTA/EGTA處理過的神經(jīng)組織能使得神經(jīng)組織中小膠質(zhì)細胞的一些功能特性發(fā)生改變，從而將小膠質(zhì)細胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞。本體系提供了佳的組織分離條件，分離單個細胞的效率是已出版文獻中所報道的5~6倍。此外，本體系還能保證所分離的細胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系，可以大程度地降低所培養(yǎng)的小膠質(zhì)原代細胞中成纖維細胞的含量。 大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的神經(jīng)小膠質(zhì)。本試劑盒包含： （）OptiTDSTM大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞組織解離液（3×ml） （2）大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞組織處理緩沖液（00ml） （3）FibrOutTM大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞成纖維抑制劑（ml（500X）） （4）大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)組織洗液（5 x 00 ml） （5）大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞生長因子（ml500X）及血清（5x0ml） （6）大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基（5 x 00ml） （7）大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)組織預(yù)備液（ x 00 ml） （8）大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟：
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)試劑盒說明書對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按：2到：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按：2到：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

CEACAM5 / CD66e 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

VDR-NR 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P   IF  ICC/IF    50 µg

CD56a 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P    50 µg

2B4 / SLAMF4 / CD244 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

TROP2 / TACSTD2 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM   IF   ICC/IF   25 Test

CD7 / N-CAML / LCAM 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

NSE(Gamma-enolase) 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC-P    50 µg

IL7 / IL7a 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD77 / PRV- / PRV 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

CSEN / calsenilin / KCNIP3 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)試劑盒說明書穗花杉雙黃酮英文名稱：Amentoflavone分子式：538.46分子量：C30H8O0：67-53-4

雙去甲氧姜黃素英文名稱：Double de methyl oxygen group分子式：308.33分子量：C9H6O4：24939-6-0

(R)-alpha-Methylasparticacid-4-tert-butylester英文名稱：(R) acid-4-tert-butyl ester -alpha-Methylaspartic分子式：203分子量： C9H7NO4：23709-25-3

丙硫咪唑分子式：265.33英文名稱：Albendazole：54965-2-8分子量： C2H5N3O2S

鄰二氯分子式：47英文名稱：Adjacent two：95-50-分子量： C6H4Cl2

3-氯-2,4,5,6-四氟吡分子式：85.5英文名稱：3- chloro -2,4,5,6- Pyridines：735-84-8分子量： C5ClF4N

-溴-3,4,5-三氯分子式：260.34英文名稱：- three -3,4,5-：2928-5-8分子量： C6H2BrCl3

芴英文名稱：Fluorene分子式：66.22分子量： C3H0：86-73-7

二茚二氯鋯英文名稱：Two two indenyl zirconium chloride分子式：392.43分子量： C8H4Cl2Zr：248-49-

2,4,6-三溴甲分子式：328.83英文名稱：2,4,6- three：6320-40-7分子量： C7H5Br3

注意事項：
. 接收到大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)試劑盒說明書，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞00X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。