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大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書

大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書

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大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書

Rat BrainPrimaCell: Normal Nerve Microglia

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大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒【Rat BrainPrimaCell: Normal Nerve Microglia】
     大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書神經(jīng)是神經(jīng)纖維構(gòu)成的組織,把腦和脊髓的興奮傳給各個(gè)器官或把各個(gè)器官的興奮傳給腦和脊髓。其中,鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)形成的主要功能細(xì)胞。神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中,當(dāng)程序性細(xì)胞死亡時(shí),或在大腦發(fā)育的過程中,中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時(shí),神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細(xì)胞。膠質(zhì)細(xì)胞能在II類組織相容性復(fù)合體表達(dá)CD-4陽性T細(xì)胞時(shí)表達(dá)抗原,能進(jìn)行Fc介導(dǎo)的巨噬作用,并且與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞組織共享抗原。 利用本公司試劑盒中提供的神經(jīng)組織分離體系來分離,EDTA/EGTA處理過的神經(jīng)組織能使得神經(jīng)組織中小膠質(zhì)細(xì)胞的一些功能特性發(fā)生改變,從而將小膠質(zhì)細(xì)胞分離開來。

本試劑盒適用于分離培養(yǎng)大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞。本體系提供了佳的組織分離條件,分離單個(gè)細(xì)胞的效率是已出版文獻(xiàn)中所報(bào)道的5~6倍。此外,本體系還能保證所分離的細(xì)胞在培養(yǎng)基中具有很高的活性。利用的成纖維抑制體系,可以大程度地降低所培養(yǎng)的小膠質(zhì)原代細(xì)胞中成纖維細(xì)胞的含量。 大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒適合于培養(yǎng)大鼠的神經(jīng)小膠質(zhì)。本試劑盒包含: ()OptiTDSTM大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞組織解離液(3×ml) (2)大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞組織處理緩沖液(00ml) (3)FibrOutTM大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞成纖維抑制劑(ml(500X)) (4)大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)組織洗液(5 x 00 ml) (5)大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)因子(ml500X)及血清(5x0ml) (6)大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基(5 x 00ml) (7)大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)組織預(yù)備液( x 00 ml) (8)大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒使用說明書
培養(yǎng)步驟:
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按:2到:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按:2到:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。?

CEACAM5 / CD66e 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

VDR-NR 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P   IF  ICC/IF    50 µg

CD56a 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 IHC-P    50 µg

2B4 / SLAMF4 / CD244 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

TROP2 / TACSTD2 抗體 (FITC), 兔單抗 FCM   IF   ICC/IF   25 Test

CD7 / N-CAML / LCAM 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

NSE(Gamma-enolase) 抗體, 兔多抗, 抗原親和純化 WB   IHC-P    50 µg

IL7 / IL7a 抗體, 鼠單抗 ELISA    50 µg

CD77 / PRV- / PRV 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

CSEN / calsenilin / KCNIP3 抗體, 兔多抗 ELISA    400 µg

大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書穗花杉雙黃酮英文名稱:Amentoflavone分子式:538.46分子量:C30H8O0:67-53-4

雙去甲氧姜黃素英文名稱:Double de methyl oxygen group分子式:308.33分子量:C9H6O4:24939-6-0

(R)-alpha-Methylasparticacid-4-tert-butylester英文名稱:(R) acid-4-tert-butyl ester -alpha-Methylaspartic分子式:203分子量: C9H7NO4:23709-25-3

丙硫咪唑分子式:265.33英文名稱:Albendazole:54965-2-8分子量: C2H5N3O2S

鄰二氯分子式:47英文名稱:Adjacent two:95-50-分子量: C6H4Cl2

3-氯-2,4,5,6-四氟吡分子式:85.5英文名稱:3- chloro -2,4,5,6- Pyridines:735-84-8分子量: C5ClF4N

-溴-3,4,5-三氯分子式:260.34英文名稱:- three -3,4,5-:2928-5-8分子量: C6H2BrCl3

芴英文名稱:Fluorene分子式:66.22分子量: C3H0:86-73-7

二茚二氯鋯英文名稱:Two two indenyl zirconium chloride分子式:392.43分子量: C8H4Cl2Zr:248-49-

2,4,6-三溴甲分子式:328.83英文名稱:2,4,6- three:6320-40-7分子量: C7H5Br3

注意事項(xiàng):
. 接收到大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒說明書,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞00X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA-.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 

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