小鼠垂體瘤細(xì)胞；GT-說(shuō)明書(shū)

本公司提供的細(xì)胞都是現(xiàn)貨供應(yīng)，詳細(xì)小鼠垂體瘤細(xì)胞；GT-說(shuō)明書(shū)說(shuō)明書(shū)！

細(xì)胞名稱(chēng) 小鼠垂體瘤細(xì)胞；GT-說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性 上皮樣

生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)

特征特性 GT-為GT細(xì)胞系的亞克隆，GT來(lái)源于穩(wěn)定表達(dá)SV40大T抗原的轉(zhuǎn)基因小鼠產(chǎn)生的可以分泌促性腺釋放LHRH的腫瘤。GT-細(xì)胞可以表達(dá)pro-LHRH mRNA，并向培養(yǎng)基中分泌LHRH樣的免疫反應(yīng)性的物質(zhì)。

培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-2 4.5g/Liter Glucose) 5%FBS+5%HS

傳代方法 :3傳代；5~7天次。

傳代情況 P20

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS

支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）

STR -

同工酶

染色體

主要功能：
（）小鼠垂體瘤細(xì)胞；GT-說(shuō)明書(shū)血管平滑肌細(xì)胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
（2）表達(dá)鈣通道及ICAM-和VCAM-，參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
（3）與血管疾病的進(jìn)展和穩(wěn)定有關(guān)。
 生理變化：
（）主動(dòng)脈硬化。
（2）主動(dòng)脈瘤
（3）主動(dòng)脈鈣化。
基本特性：
（）小鼠垂體瘤細(xì)胞；GT-說(shuō)明書(shū)組織來(lái)源于正常大鼠大動(dòng)脈組織。
（2）鑒定：肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
（3）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（4）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)：>5×05 cells/ml。
（5）肌動(dòng)蛋白，alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗(yàn)證。
（6）不含有HIV-、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

運(yùn)輸和保存：
小鼠垂體瘤細(xì)胞；GT-說(shuō)明書(shū)視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
)mL凍存細(xì)胞懸液裝于.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存?zhèn)€月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
具體操作：
.預(yù)熱培養(yǎng)用液：把已經(jīng)配制好的裝有培養(yǎng)液、PBS液和的瓶子放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱。
2.用75％酒精擦拭經(jīng)過(guò)紫外線照射的超凈工作臺(tái)和雙手。
3.正確擺放使用的器械：保證足夠的*作空間，不僅便于*作而且可減少污染。
4.點(diǎn)燃酒精燈：注意火焰不能太小。
5.準(zhǔn)備好將要使用的消毒后的空培養(yǎng)瓶，放入微波爐內(nèi)高火，8分鐘再次消毒。
6.取出預(yù)熱好的培養(yǎng)用液：大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞取出已經(jīng)預(yù)熱好的培養(yǎng)用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺(tái)內(nèi)。
7.從培養(yǎng)箱內(nèi)取出細(xì)胞：注意取出細(xì)胞時(shí)要旋緊瓶蓋，用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺(tái)面，再在鏡下觀察細(xì)胞。
8.打開(kāi)瓶口：將各瓶口一一打開(kāi)，同時(shí)要在酒精燈上燒口消毒。?

蝙蝠葛蘇林堿 CAS 70553-76-3 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 0mg

五指毛桃 CAS  訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： g

0-姜酚 CAS 2353-5-7 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

環(huán)維黃楊星D CAS  訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

大葉茜草素 CAS 5548-88-4 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

續(xù)斷（川續(xù)斷） CAS  訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 3g

膠乳粒子標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（20μm） CAS  訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 0mL

甘草次酸;8 β-Glycyrrhet CAS 47-53-4 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

天素;Gastrodin CAS 62499-27-8 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 20mg

;Theobromine CAS 83-67-0 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 50mg

奇任醇 CAS 52659-56-0 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/vial

槲皮素;Quercetin CAS 7-39-5 訂購(gòu)|咨詢  規(guī)格： 00mg

小鼠垂體瘤細(xì)胞；GT-說(shuō)明書(shū)Rabbit Anti-chicken IgG/Bio  標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.mlc-Myb  轉(zhuǎn)錄激活因子MYB抗體 規(guī)格: 0.2ml

Cip4  細(xì)胞分化周期CDC42相互作用蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

HSD7B3  羥類(lèi)固醇脫酶7β3抗體 規(guī)格: 0.2ml

CPSA(C2F9)  復(fù)合前列特異性抗原單克隆抗體 規(guī)格: 0.2ml

OPCML  片樣物質(zhì)結(jié)合蛋白/細(xì)胞粘附分子樣蛋白抗體 規(guī)格: 0.ml

Bax  Bax抗體 規(guī)格: 0.ml

GPV/Goose parvovirus  鵝細(xì)小病毒GPV抗體 規(guī)格: 0.2ml

Goat Anti-Mouse IgM  羊抗小鼠IgM 規(guī)格: mg

ADM (ProAM-N20)  上髓質(zhì)素抗體(N端20肽) 規(guī)格: 0.ml

SCEL  SCEL蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-RelB(Ser552)  磷酸化核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體 規(guī)格: 0.ml

操作流程：
. 小鼠垂體瘤細(xì)胞；GT-說(shuō)明書(shū)主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-43），co2孵箱（日本yamato it-6）。
.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
.2. 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～0倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以×05/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細(xì)胞48h換液次，細(xì)胞長(zhǎng)至60%～70%融合時(shí)，用0.25%消化～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散，為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細(xì)胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞，待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液，用0×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù)，按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液＝(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×04。
.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞，以0.25％消化成單細(xì)胞懸液，計(jì)數(shù)后分別接種于2個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中，每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞，加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×00％，計(jì)算貼壁率。 
.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液，以×04/孔接種于24孔板，每孔加入ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔，計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)0d，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線